酶切点位
5-GG↓CGCGCC-3
3-CCGCGC↑GG-5

产品信息
 
产品名称
产品编号
规格
价格（元）
FuniCut™ AscI  
15001ES50
50 T
165.00
 
产品描述
 
FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
 
产品组分
 
组分编号
组分名称
产品规格
15001-A
FuniCut™ AscI
50 μL
15001-B
10×FuniCut™ Buffer
1 mL
15001-C
10×FuniCut™ Color Buffer
1 mL
 
运输与保存方法
 
冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。
 
识别位置
 
5-GG↓CGCGCC-3
3-CCGCGC↑GG-5
 
推荐反应条件
 
1× FuniCut™ 缓冲液；
最适37°C孵育。
 
失活条件
 
80°C孵育20 min。
 
注意事项
 
1）3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性；
2）受CpG甲基化影响，序列完全重叠，剪切阻断；
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；
4）本产品仅作科研用途！


质量控制
 
1. 功能活性检测：最适反应温度下，在20 μL反应体系中，1 μL酶能够在15 min内完全消化1 μg λDNA (HindIII digest)。
2. 超长时间孵育检测：最适反应温度下，将1 μL酶与1 μg λDNA (HindIII digest)共孵育3 h，未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解，但延长孵育时间可能出现星号活性。
3. 酶切-连接-再酶切检测：最适反应温度下，使用1 μL酶消化底物，回收酶切产物，在22°C下使用适量T4 DNA连接酶可以将酶切产物重新连接，将连接产物再次回收后，使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。
4. 非特异性内切酶活性检测：最适反应温度下，将1 μL酶与1 μg超螺旋质粒DNA共同孵育4 h后，使用琼脂糖凝胶电泳检测，质粒DNA仍然处于超螺旋状态。
5. 蓝白斑检测：将含有单一lacZα基因的载体以1 μL酶消化，重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞，涂布在含有对应抗生素、IPTG和X-gal的LB培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落，而连接错误（即DNA末端切口不完整）的产物将得到白色菌落。对于FuniCut™系列限制酶而言，白色菌落比例应小于1%。
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