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Th1/Th2/Th17细胞因子检测应用方案

作者:北京旷博生物技术股份有限公司 2014-11-24T09:59 (访问量:11035)

 

建议检测指标

Th1/Th2/Th3/Tfh/Th17/Treg相关因子

IFN-γIL-2IL-4IL-5IL-6IL-7IL-10/CSIFIL-12/IL-23 p40IL-12 p70IL-13IL-17A/CTLA-8IL-17F/ML-1IL-21IL-22/IL-TIFTGF-beta 1TSLP

检测目的: 检测免疫状态,观察疾病进程,判断预后,辅助诊断,药效评价等。

应用举例:

药效评价试验

     用小鼠的腹腔巨噬细胞,经炎症激发因子(LPS)诱导建立了巨噬细胞炎症模型。在该模型中可通过测定被筛选化合物抑制IL-2IL-4IL-6IL-10IL-17ATNFα,IFN-γ各细胞药因子表达的程度来评价化合物的抗炎活性。本试验所建立的药物筛选模型是一种灵敏、高效、可靠、适于高通量抗炎药物筛选的细胞模型。

试验方法:

1. 样本制备:接种106小鼠巨噬细胞至每孔培养,分为空白组和LPS实验组; LPS实验组细胞用LPS刺激24小时后, 分别加入不同浓度(分别为10-5 mg/ml, 10-6 mg/ml, 10-7 mg/ml)的1# 2#号药物,继续培养48小时,收集各细胞培养上清15000 RPM,离心10min,取上清-80保存备用。

2. 检测步骤: 用 Ainplex ®Mouse Th1/Th2/Th17 7-plex检测试剂盒进行检测。加入45ul 捕获微球混悬液入96孔板,分别加入标准品和稀释样本45ul,室温避光孵育1h,洗涤后加入25ul生物素偶联的检测抗体,室温避光孵育30min,洗涤后加入25ul链霉亲和素标记的PE工作液,洗涤后加入 150 ul 洗液,重新悬浮微球。使用流式细胞仪上机检测。

3. 结果分析:用FCAP Array软件分析各个因子检测数据,分析IL-2IL-4IL-6IL-10IL-17ATNFα,IFN-γ各因子变化趋势,筛选炎症抑制效果理想药物及其浓度。


                                                     各样本中不同细胞因子含量结果图

结论:

1. 小鼠巨噬细胞用LPS刺激后IL-2IL-4IL-6IL-10IL-17ATNFα,IFN-γ均有一定程度的增高,其中TNF-α,IL-6IL-10IFN-γ较为明显。

2. 1#药物在10-5,10-6浓度时,对各因子均有明显抑制作用,在10-7浓度时抑制作用明显降低。

3. 2#药物在10-5浓度时,对各因子均有明显抑制作用,在10-6浓度时抑制作用明显降低,10-7浓度没有抑制作用。

4. 总体结果1#药物效果明显比2#药物要好,即抗炎效果更有效。

推荐产品及货号

PN

Name

Description

Size

C190010

Human Th1/Th2 10-plex

IFNgamma, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, TNFalpha

96 T

C191107

Human Th1/Th2/Th17 7-plex

IFN-gamma,IL-10/CSIF,IL-17A/CTLA-8,IL-2,IL-4,IL-6,TNF-alpha

96 T

C191114

Human Th1/Th2/Th17 14-plex

IFNgamma, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IL-17A, IL-17F, IL-22, TNFalpha, TNFbeta

96 T

C191118

Human Th1/Th2/Th17 18-plex

GM-CSF, IFNgamma, IL-1beta, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-9, IL-10, IL-12p70, IL-17A, IL-17F, IL-22, IL-33, TNFalpha, TNFbeta, TSLP

96 T

C281107

Mouse Th1/Th2/Th17 7-plex

IFN-gamma,IL-10/CSIF,IL-17A/CTLA-8,IL-2,IL-4,IL-6,TNF-alpha

96 T

C281114

MouseTh1/Th2/Th17 14-plex

IFNgamma, IL-1alpha, IL-1beta, IL-2 , IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A, IL-21, IL-22 and TNFalpha

96 T

C281118

MouseTh1/Th2/Th17 18-plex

GM-CSF, IFNgamma, IL-1alpha, IL-1beta, IL-2 , IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A, IL-21, IL-22, IL-23, KC, TNFalpha and TSLP

96 T

C281116

MouseTh1/Th2/Th17 16-plex

GM-CSF, IFNgamma, IL-1alpha, IL-1beta, IL-2 , IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12p70, IL-13, IL-17A, IL-21, IL-23, KC, TNFalpha

96 T

C371107

Rat Th1/Th2/Th17 7-plex

IFN-gamma,IL-10/CSIF,IL-17A/CTLA-8,IL-2,IL-4,IL-6,TNF-alpha

96 T

参考文献:
[1]Bettelli E, Carrier Y, Gao W,et a1.Reciprocal developmental pathways for the generation of pathogenic effector Th17 and regulatory T cells
Nature2006441(7090)235-238.
[2]Chen Z
Lin FGao Yet a1.FOXP3 and RORrttranscriptional regulation of Treg and Th17.Int Immunopharmacol201111(5)536-542.
[3]Usui T.Transcription factors that regulate helper T cell differen-tiation.Nihon Rinsho Meneki Gakkai Kaishi
200730(6):4l9-427.
[4]Hartmann P,Plum G.Immunological defense mechanisms in tuberculosis and MAC-infection.Diagn Microbiol Dis,1999,34:147-152.
[5]Appelberg R. Protective role of interferon gamma,tumor necrosis factor alpha and interleukin-6 in mycobacterium tuberculosis and M.avium infections.Immunobiology
1994,191(4-5):520.

 

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